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聚合物基質(zhì)液相色譜柱的維護分為哪幾部分

更新時間:2019-07-10      點擊次數(shù):1170
聚合物基質(zhì)液相色譜柱具有相當強的硬度,有無孔和有孔兩種規(guī)格。該固定相中含有苯基官能團,可與待測物發(fā)生疏水相互作用。廣泛用于各種不同基質(zhì)中糖分子、糖醇和其他水溶性物質(zhì)的分離。Carbo-H可以用來分析有機酸及利巴韋林等物質(zhì),Carbo-Ca可以用來分離樹膠醛糖、阿糖醇等糖類。
聚合物基質(zhì)液相色譜柱采用聚合物基質(zhì)填料,色譜柱化學穩(wěn)定性好,壽命長,分離效果隨時間變化小。能用堿性溶液進行清洗再生。適用于蒸發(fā)光散射檢測器、電霧化檢測器以及LC/MS。
 
聚合物基質(zhì)液相色譜柱的維護分為:色譜柱的平衡、色譜柱的再生、然后才是色譜柱的維護。下面詳解:
1.色譜柱的平衡
反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。 每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得大的"補償",而且您的色譜柱的壽命也會變得更長。
操作步驟:
a.平衡開始時將流速緩慢地提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時間來平衡)
 
b.如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡; 分析結束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。
 
2.色譜柱的再生
長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)??梢詫ιV柱進行再生,在有條件的實驗室應使用一個廉價的泵進行柱子的再生。
選擇再生方法:
極性固定相的再生:
正庚烷→lv仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水
非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生: 水→乙腈→lv仿(或異丙醇)→乙腈→水
 
聚合物基質(zhì)液相色譜柱的維護
a.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)。
b.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍。
c.避免流動相組成及極性的劇烈變化。
d.流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理。
e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中。
f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內(nèi)不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。